小编艺名：多肽A梦, 微信：allpeptide

一、为什么要追求新的肽合成方法

酰胺键形成是有机合成中最常用的反应之一，也是在制药工业中进行的最常用的药物化学反应。遗憾的是，所涉及的反应条件都特别浪费试剂并因此对环境有害，同时反应过程中也可能存在安全隐患。

至今仍使用的有毒性的溶剂有：二甲基甲酰胺（DMF）、N-甲基-2-吡咯烷酮（NMP）和二氯甲烷（DCM）。所以寻求更环保的有机溶剂一直是一个热门话题，特别是对于溶剂消耗多，逐步反应的固相多肽合成研究。而水（天然肽生物合成培养基）的使用对有机化学家来说是一个挑战，主要是出于溶解性原因。

今天介绍一种新型的合成肽的方法：使用少量的表面活性剂TPGS-750-M在室温下在水中制备多肽，从而取代有机溶剂作为反应介质。对于简单偶联，肽合成的时间通常需要3-4小时，对于两步去保护加偶联过程通常需要8小时。反应后可通过简单的萃取和酸性/碱性水洗涤来拿到最终的肽。下面介绍下此类反应。

（胶束中的肽合成由TPGS-750-M-H2O组成）-专肽生物

二、介绍Cbz-L-Ala-L-Phe-L-Leu-OEt（II-1）和Cbz-L-Lys（Boc）-L-的肽合成制备过程

我们选择了Cbz-L-Ala-L-Phe-L-Leu-OEt（II-1）和Cbz-L-Lys（Boc）-L-的肽合成制备。 Pro-L-Val-OMe（II-2）作为α-MSH-13的C-末端三肽部分的前体，以其抗炎作用而闻名。

证明了两个阶段：二肽前体Cbz-L-Phe-L-Leu-OEt（I-1）和Cbz-L-Pro-L-Val-OMe（I-2）的制备及其一锅法去保护/与第三种被保护的氨基酸（分别为Cbz-LAla-OH和Cbz-L-Lys（Boc）-OH）偶联。通常偶联浓度较高并充分搅拌，产率也会更高。

1，第一步 二肽前体的制备：Cbz-L-Phe-L-Leu-OEt（I-1）和Cbz-L-Pro-L-Val-OMe

（在2％（wt / wt）TPGS-750-M-H2O中合成的两种代表性二肽的反应途径）

二肽的制备描述了两种前体Cbz-L-Phe-L-Leu-OEt（I-1）和Cbz-L-Pro-L-Val-OMe（I-2）的合成，使用茚三酮通过薄层色谱（TLC）定性检测游离胺的消失。偶联反应通常在1小时内完成。所有副产物都可溶于水，因此纯化只需用甲基叔丁基醚（MTBE）或EtOAc进行简单萃取，然后进行酸性和碱性水洗涤。如果二肽直接用于两步一锅去保护/偶联序列，则不需要进一步纯化。对于最终产品，通过二氧化硅垫的快速过滤消除了所有剩余的TPGS-750-M的痕迹，产生所需的纯肽。该方法适用于广泛的氨基酸、脂族胺或脂肪酸，并且已证明在克级规模上有效，提供相似的产率。不过有甘氨酸参与的肽合成，通常产率会偏低些，可能是由于溶解性较差的原因。，但是它们的合成可以通过共溶剂来改善。为了放大和工业目的，强烈推荐使用10％（体积/体积）的共溶剂（例如THF）以更好地处理反应。

2，第二步 上述二肽和N-保护的氨基酸继续反应，形成三肽

三肽的合成-专肽生物

三肽的制备在该方法中，将制备的Cbz-二肽I-1和I-2用Pd / C和H 2气体脱保护。最初的脱保护反应通常需要约2小时才能完成，并且可以通过TLC监测。需要1当量的HCl形成铵盐并防止催化剂中毒。在氩气喷射以释放氢气之后，然后可以使用优化的偶联方法，在反应容器中加入下一个N-保护的氨基酸/肽，同时添加另一部分2％（wt / wt）TPGS-750-M- H2O溶液将总浓度降低至0.25M。选择使用亲脂性的羧基苄基（Cbz），这增加了氨基酸在胶束核心内的溶解度。此外，使用该保护基可使其脱保护过程中，仅产生甲苯和CO 2副产物，使后续步骤不受影响。在可能存在溶解度问题的情况下，特别是当所得产物是固体时，添加10％（体积/体积）THF可有助于改善反应混合物的产率和处理。最终产物用乙酸乙酯（EtOAc）萃取，萃取物通过硅藻土过滤以除去Pd / C。在酸性和碱性水洗涤之后，我们在硅胶柱上进行纯化，得到所需的三肽，产率高。该方法可非常有效地获得高产量的短肽。

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